无菌器械实训报告范文 第一篇

无菌操作技术及其重要性

杨昆霖1 郑涛1 张雷1 张哲1 李杰2

1.北京大学医学部临床医学08级一班学生 2.北京大学医学部微生物学系副教授

【摘要】 目的：建立无菌观念，认识无菌操作的重要性，学习并掌握基本的无菌操作方法。方法：对暴露于空气中不同时间长短的琼脂培养基进行培养并观察；对不洗的手和洗过手但擦干与没擦干的手在培养基上按手印并对培养基进行培养；运用无菌接种技术接种并培养大肠埃希氏菌和表皮葡萄球菌；运用紫外光线照射培养中的细菌并观察被照射部分的菌落生长情况。结果：暴露在空气中的培养基上生长出了菌落，且菌落的数量随暴露在空气中的时间增长而增加；洗手组和不洗手组均出现了数量不等的菌落；紫外线照射下的培养基上没有菌落生长或菌落少于非照射组。

【关键词】 无菌操作；接种；培养；重要性

尽管我们的肉眼无法直接看到细菌的踪影，但在空气中，人体皮肤表层和深层，细菌却是无处不在。而在实验研究中，保证实验用具和试验用微生物不被杂菌污染显得尤为重要。生活中或是实验中，人们常常可以通过各种方法（洗液清洗、紫外杀菌等）来达到减少细菌或是灭菌的状态。本实验通过细菌培养的方法验证空气和人的皮肤存在大量细菌，运用紫外光照射培养基验证紫外线灭菌作用。

无菌器械实训报告范文 第二篇

实验十二 微生物实验操作基础——灭菌及无菌操作

一、目的要求 学习灭菌的方式方法，区别几种灭菌方式的相同点和不同点。掌握实验室无菌操作的操作方法和注意事项，体会无菌操作技术在微生物研究中的重要性。

二、知识介绍

灭菌技术sterilization

为什么要灭菌？（杂菌污染的后果）

1.营养基质或产物被消耗损失；

2.抑制生产菌的生长；

3.抑制产物的生物合成；

4.杂菌繁殖导致培养液性质（如pH）改变，造成生物反应异常。

灭菌原理与方法

灭菌(sterilization）是指利用物理或化学方法，杀灭或去除物料或设备中所有微生物的技术或 工艺过程。灭菌方法有化学物质灭菌、辐射灭菌、过滤介质除菌和热灭菌等。

（一）、化学物质灭菌

通过改变微生物细胞膜的渗透性，或者损伤细胞膜，影响微生物细胞的正常代谢。

不适合于培养基的灭菌，只适合于局部空间或某些器械的消毒。

1.无机酸、碱及盐类

酸碱的杀菌能力主要由其电离度而定，电离出得氢离子或氢氧根离子浓度越高，杀菌力越强。

盐溶液的杀菌力与其浓度成正比。

（腌咸菜可以保藏很长时间而不染菌）

2.重金属盐

杀菌原理是重金属盐使细胞中蛋白质失活。

无菌器械实训报告范文 第三篇

实验2、实验准备与无菌操作规范

【实验目的】 1.掌握细胞培养的基本概念

2.了解细胞培养的基本条件

3. 掌握清洗和消毒的基本方法

4. 学习细胞培养使用液的配制及准备方法

【实验原理】 1.体外培养（in vitro culture) 的基本概念

将活体结构成分（甚至个体）从体内或其寄生体内取出，放在类似于体内生存环境的体外环境中，让其生长和发育的方法。按照体外培养的结构成分，可将体外培养人为地分为：组织培养（tissue culture）、器官培养（organ culture）、细胞培养（cell culture)

（1）器官培养（Organ Culture） 培养的是器官的原基、器官的一部分或整个器官，使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。

（2）组织培养(Tissue Culture)是指从生物体内取出活的组织（多指组织块）在模拟体内生理环境下，使之 生存和生长并维持其结构和功能的方法。

（3）细胞培养(Cell Culture)是指将活细胞（尤其是分散的细胞）在体外进行培养的方法。

2. 组织细胞培养的优点

能够长时间观察细胞的生命活动

容易控制实验条件，有利于生物学研究

无菌器械实训报告范文 第四篇

实验室无菌操作规章制度

洁净区内器械消毒灭菌要求

无菌区外的器械清洁消毒

1)配平天平：每周至少消毒1次，表面用蘸84消毒液的无尘纸擦拭，再用75%医用酒精擦拭。

2)台式冷冻离心机内腔及适配器：每日操作结束时用75%医用酒精对离心机内腔以及适配器内外表面进行充分消毒，并整齐摆放于实验台晾干备用。

3)光学显微镜及倒置显微镜：每周对显微镜至少清洁消毒1次，用无尘纸擦拭显微镜台面及外表面，用镜纸蘸95%乙醇擦拭镜头和目镜。

4)疫苗箱洗涤消毒：对于用过的疫苗箱应每天用配制的84消毒液浸泡过夜，再用自来水冲洗表面，无尘纸擦拭箱内表面。

无菌操作区内的器械清洁消毒

1)手动移液器消毒：手动移液器表面应每周用75%医用酒精清洁消毒，将手动移液器吸头取下，更换过滤膜后再装上吸头；将手动移液器放于试验台充电，充电并消毒后放回无菌操作台原位，使用前还应开启无菌台内紫外消毒30min。

2)剪刀、镊子、止血钳及不锈钢器械：不锈钢器械每处理一份标本都应更换，使用过的器械应用戊二醛浸泡2h，此后用自来水冲洗至少20遍，再用去离子水冲洗3遍，用纱布擦干后经包布包裹放入干净的消毒盒中，贴上灭菌标签并标记日期，采用湿热灭菌121℃/30min，灭过的器械放洁净储物箱备用。

无菌器械实训报告范文 第五篇

无菌操作基本技术

1.在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放于操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒，以避免往返拿取造成污染机率增大。

超净工作台台面每次实验前用75％酒精擦拭，按照顶板→侧壁→器械→挡风玻璃→操作台面的顺序对超净台内部进行彻底的消毒。然后开启超净台和无菌培养室的紫外灯照射30min，关闭紫外，启动风机运转15分钟后，方可开始实验操作。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线。

2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流流通。实验用品以75 % 酒精擦拭后放入无菌操作台内。实验操作应在台面中央的无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。

3. 小心取用无菌实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖端或容器瓶口，亦不要在开口容器的正上方操作。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用。

4. 操作人员应注意自身安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心毒性药品，例如DMSO，并避免尖锐针头的伤害等。

无菌器械实训报告范文 第六篇

培养基的配制和灭菌 细菌的纯种分离、培养 接种技术及菌落形态的观察

姓名：张世凡

学号：201330480123

课程名称：环境工程微生物实验

一、实验目的

1、熟悉玻璃器皿的洗涤与灭菌前的准备工作。

2、了解微生物培养基的基本原理，掌握配制、分装培养基的方法。

3、学习各类物品的包装、配制、灭菌技术。

4、从环境中分离、培养微生物，掌握一些常用微生物和纯化微生物的方法。

5、学会几种接种技术。

6、平板菌落计数。

7、抗Cu菌的筛选。

8、观察实验分离出来的几种细菌的个体形态及与其相应的菌落的形态特征。

9、通过观察和比较细菌，放线菌，酵母菌及霉菌的菌落形态，达到初步鉴别微生物的能力。

二、实验原理

1、培养基原理：培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，有碳、氢‘氧、氮、磷、硫、钾、钙、钠、镁、铁、等微量元素和水，按一定的体积分数配制而成。调整适合的pH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。 由于微生物的种类及代谢类型的多样性，因而培养基放入种类也多，他们的配方及配制法也有所差异，但一般的配置过程大致相同。

本实验采用肉汤蛋白胨培养基、查氏培养基（筛选霉菌）、高氏1号淀粉琼脂培养基（筛选放线菌）。